英文名称： Neutrophil gelatinase-associated lipocalin（NGAL）
人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白试剂盒（胶乳免疫比浊法）说明书
Neutrophil gelatinase-associated lipocalin（NGAL）
产品名称：人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白试剂盒
英文名称：Neutrophil gelatinase-associated lipocalin（NGAL）
包装规格：R1:40ml R2:10ml
【预期用途】
人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白测定试剂盒用于体外定量测定人体血浆或尿液中人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白含量。
人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase -associated lipocalin,NGAL),也称为Lipocalin-2（脂质运载蛋白-2），是脂质运载蛋白家族的一个新成员，它是肾功能损伤早期的生物标志物。NGAL不仅仅存在于嗜中性粒细胞中，也会出现在特定的上皮细胞内，例如发生缺血性和毒性肾损伤过程中，肾小管上皮细胞中的NGAL将显著增加，在开始的两个小时内，尿液和血液中NGAL水平将显著增加，因此，NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志之一。也有研究表明心绞痛、急性心肌梗死患者血清中NGAL浓度升高。
【检验原理】
以胶乳免疫比浊法为测定原理，样品中的人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白与试剂中的羊抗人人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白抗体相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生混浊，在540nm波长处检测其浊度的变化，其浊度高低与样品中人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白浓度成正比。
【主要组成成份】
| 组成 | 终浓度 |
| R1：缓冲液 | 100mmol/L |
| 叠氮钠 | 0.09% |
| R2：抗人NGAL抗体胶乳颗粒 | 0.12g/L |
| 叠氮钠 | 0.09% |
校准品：6个水平的液体校准品，在50mmol/L PH=7.4 的***酸盐缓冲液中添加人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白，稳定剂<0.1%；定值范围 0、50-200、200-500、1000-2000、2000-4000、4000-6000ng/mL。
质控品：2个水平的液体质控品，在50mmol/L pH=7.4 的***酸盐缓冲液中添加人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白，稳定剂<0.1%；定值范围50-250、300-700ng/mL。
注：具体定值见试剂瓶标签。
【储存条件及有效期】
原包装试剂盒（包括校准品和质控品）在（2-8）℃下有效期为18个月，失效期见产品标签所示。开瓶后，在（2-8）℃保存，可以稳定14天。
【适用仪器】
本试剂盒适用于日立Hitachi7020/7060/7180/7600/7100、奥林帕斯OlympusAU400/ AU2700、贝克曼Beckman UnicelDxC 800/UnicelDxC600/ AU680 /AU5800 /CX 4/7/9、西门子SIEMENS ADVIA1800/ ADVIA2400/ Dimension RxL Max /Dimension xpand、东芝Toshiba 40FR/ 2000、雅培 Abbott C16000、北京利德曼BA800生化分析仪。
【样本要求】
1、样本种类：新鲜的人血浆，采血后应及时分离。尿液标本采集后15min内进行离心（2000r/min,5min）,取上清尿液进行检测。
2、样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和脂血的样本都可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。
3、血浆在2-8℃中保存，可稳定1周，-20℃大约可稳定1个月。尿液标本于4℃保存，需在24小时内完成检测，尿液标本于-20℃保存可以保存7天。
【检验方法】
校准程序：
1、校准品为液体，可直接使用。
2、使用后将瓶盖拧紧，避免污染，在（2-8）℃保存，不可冻存，不可将使用过的校准品倒回原包装瓶中。
3、使用人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白校准品定标。
4、校准程序的要求见所使用分析仪器的说明书。
5、校准及校准频次的要求：正常情况下，应每两周至少进行一次校准。当发生下列情况时（如：使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等），应重新对测定进行校准后对患者的样本进行检测。
质控程序：
1、测量利德曼质控品，测试结果在质控范围内方可进行标本的检测。
2、质量控制要求：正常情况下，每次检测患者样本时应至少对所选择的质控品进行一次测定。当发生下列情况时（如：使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等），应至少对所选择的质控品进行一次测定。
3、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围的处理程序：
重新对所选择的质控品进行测定。
如测定结果仍无改变，应考虑换一瓶新的质控品再进行测定。
如测定结果仍无改变，应考虑对测定重新进行校准后再对质控品进行测定。
如测定结果仍无改变，应考虑换一瓶（或批）试剂进行测定。
如测定结果仍无改变，应考虑与公司技术服务部门联系。
操作步骤：
| 标本量 (S) | sample volume | μL | 2 |
| 试剂1（R1） | reagent 1 | μL | 160 |
| 试剂2（R2） | reagent 2 | μL | 40 |
| S+R1在37℃保温5分钟，加入R2在37℃保温30-60秒，记录吸光度值A1，保温5min，记录吸光度值A2。 | |||
| 主波长 | main wavelength | nm | 540 |
| 副波长 | sub wavelength | nm |
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| 反应类型 | reaction type |
| 两点终点法 |
| 反应方向 | reaction direction |
| 升反应（+） |
注：详细操作方法请见所使用仪器的操作说明。
计算方法：
△A样本
NGAL浓度 = --------------× 校准液浓度（△A=A待测-A空白）
△A校准
【参考值】选择180例样本作为参考个体，血浆样本和尿液样本参考值分布均为非正态分布，按照95%可置信区间计算，参考值范围为血浆：≤200ng/mL 尿液：≤100ng/mL。各实验室建立自己的参考范围。
【检验结果的解释】
结果如超过线性范围，请用生理盐水将标本按1:1稀释，测定结果乘2。
专业人员负责检验结果的审核。检验结果会受到受检者年龄、性别、体重等的影响。通常情况下，其结果如在参考范围内，认为正常；如在临界区域内，应重新测定进行确认；如明显超出参考范围或确认检测后仍超出参考范围，则认为血清中目标含量异常。检验结果如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析并查找原因。
【检验方法的局限性】
若标本中含有的干扰物浓度满足以下要求，对检测结果无影响：胆红素≤200μmol/L、乳糜≤0.25%、VC≤0.5g/L、肝素钠≤50IU/mL。
【产品性能指标】
1、外观：液体双试剂，R1:无色至淡黄色澄清液体；R2:乳白色液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。质控品：无色至淡黄色澄清液体。
2、试剂空白吸光度：A（空白）0.3-2.0 ( 1cm；540nm；37℃)。
3、分析灵敏度：浓度为150ng/mL时，吸光度变化范围>0.01。
4、试剂测定线性：在（0–5000）ng/mL范围内：线性相关系数（r）≥0.9950；在（200 – 5000）ng/mL范围内，线性相对偏差应≤10%；（0–200）ng/mL范围内，绝对偏差≤20ng/mL范围内。
5、精密度：批内CV<10%。
6、批间差：CV<15%。
7、准确度：出厂检验：检测北京利德曼生化股份有限公司质控品，测定值在质控靶值范围内；型式检验：回收率应在85%-115%之间。
【注意事项】
1、本品仅用于体外诊断，如与人体接触，应用大量水冲洗。
2、如仪器内无指定波长，选择波长接近的数值输入。
3、建议各实验室建立自己的参考值范围。
4、不同批号的试剂不能混用；新打开的试剂不宜与已用过的试剂混合在一起，否则易造成试剂稳定性下降。
5、试剂如需废弃，请用大量水稀释后再处理。
6、不同批号的校准品定值及含量有所差异，请参考当批说明书。
【溯源性】人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）校准品溯源至人中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白纯品。
【参考文献】
1. Prasad Devarajan. Biomark Med. 2010 April ; 4(2): 265–280. doi:10.2217/bmm.10.12.
2. ARASH AGHEL, KEVIN SHRESTHA, WILFRIED MULLENS, ALLENBOROWSKI, and W. H. WILSON TANG.J Card Fail. 2010 January ; 16(1): 49–54. doi:10.1016/j.cardfail.2009.07.003.
【标签中图标解释】
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| 有效期限 |
| 阅读使用说明书 |
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| 批次号 |
| 体外诊断器械标志 |
| REF | 货号 |
| 规格 |
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| 温度限制：该产品仅可于标注温度的范围内贮存 | ||
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| 生产日期 | ||
【说明书批准及修改日期】
【生产日期】见包装标签
【生产企业】
企业名称：北京爱必信生物技术有限公司
生产地址：北京市经济技术开发区路东区科创六街88号3号楼605室
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