2×Hieff CanaceTM 高保真PCR预混液 英文名称: 2×Hieff CanaceTM High-Fidelity PCR Master Mix | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
型号:null 产品货号: 10136ES01 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
价格:请致电:010-57128832,18610462672 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
品牌: yeasen | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2×Hieff CanaceTM High-Fidelity PCR Master Mix 2×Hieff CanaceTM 高保真PCR预混液 产品信息
产品描述 2×Hieff CanaceTM High-Fidelity PCR Master Mix是即用型2×预混合溶液,包含Hieff CanaceTM High-Fidelity DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系。Hieff CanaceTM High-Fidelity DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶,具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,其保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,是普通Pfu DNA聚合酶的6倍。扩增速度可达15 sec/kb。适用于复杂模板的扩增,扩增产物为平末端。 2×Hieff CanaceTM High-Fidelity PCR Master Mix具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可进行扩增,简化了实验操作步骤,减少了人为误差,提高了实验通量和结果的重复性。本产品中含有染料,PCR产物可以直接进行电泳。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。 产品应用 基因克隆;复杂DNA模板扩增;高通量建库。 质量控制 核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII,37℃下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。 核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA,37℃温育4 h,DNA的电泳谱带无变化。 大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。 运输与保存方法 冰袋运输。-20ºC保存。 注意事项 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。 推荐PCR反应体系(冰上配制)
【注】: 1)聚合酶终浓度:在1×预混液含有1 U/50 μL的聚合酶。 2)引物:PCR反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM,推荐0.5 μM。 3)Mg2+、dNTP终浓度:在1×预混液含有1.5 mM Mg2+和200 μM的dNTP。 4)高GC模板:在体系中加入终浓度为3 %的DMSO可能有利于扩增。 5)不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系):
PCR扩增程序设置
【注】:1) 预变性温度和时间:推荐使用98℃。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。 2) 退火温度和时间:推荐使用60℃,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。 3) 延伸温度和时间:推荐使用72℃。延伸时间推荐如下:质粒DNA等简单模板为15 sec/kb;cDNA、基因组DNA等复杂模板为30 sec/kb,根据实际情况可延长至40 sec/kb。 4) 扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止该酶降解扩增产物。扩增产物为平末端,产物直接用于克隆,请使用平末端连接载体。 应用实例
HB170621
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