1、活性单位定义:在20μl 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中，6μg λDNA/Hind III的酶切产物在16℃下反应30分钟，50%的DN**段被连接所需的酶量定义为1个活性单位。

2、保存液: 10mM Tris-HCl (pH 7.4)，50mM KCl，0.1mM EDTA，1mM DTT，50% Glycerol.

3、贮存条件: -20℃.

4、反应液（10×）: 500mM Tris-HCl(pH7.5)，100mM MgCl₂，100mM DTT，10mM ATP.

5、失活或抑制:在65℃条件下加热10分钟可使该酶失活。