Taq DNA Polymerase (10× Taq Buffer含有Mg2+)
英文名称: Taq DNA Polymerase
型号:null    产品货号: PER 001-1/PER 001-2
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 北京

  • Taq DNA Polymerase 

编号

原编号

品名

浓度

规格

价格(¥)

PER001-1

DH332

Taq DNA Polymerase(10× Taq Buffer含有Mg2+)

2U/μl

200U

50.00

PER 001-2

1000U

200.00

PER 001-3

DH332

Taq DNA Polymerase(10× Taq Buffer20 mM Mg2+)

2U/μl

200U

50.00

PER001-4

1000U

200.00

PER 001-5

DH332

Taq DNA Polymerase(10× Taq BufferDF free)

2U/μl

200U

50.00

PER001-6

1000U

200.00

     10× Taq Buffer 分为含Mg2+和不含Mg2+两种,不含Mg2+Buffer,配有20 mMMgCl2

     另有不含Triton X-10010×Taq Buffer DF Free)可供选择,可根据实验需要选用。

 

  • 产品简介:

         来源于克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌,分子量94 kD,具有5→3聚合酶活性及5→3外切酶活性,无3→5外切酶活性。延伸速度2→4 kb/min,能有效扩增6 kb以下的片段。最适反应温度为70~75,最佳镁离子浓度为1~2 mM。经Taq DNA聚合酶扩增所得PCR产物3端带A,可直接进行TA克隆。

 

  • 单位定义:

       1单位Taq DNA聚合酶定义为在72,30分钟内将10 nmol同位素标记的全核苷酸掺入到DE81纸不溶物质中所需的酶量。

  • 产品储存:-20

 

  • 产品特点:

   1.高灵敏度   2.高扩增效率

 

  • 主要技术参数:

该酶具有5→3聚合酶活性及5→3外切酶活性,无3→5外切酶活性。延伸速度24kb/min,能有效扩增6kb以下的片段。最适反应温度为70~75,最佳镁离子浓度为1~2mM。经Taq DNA聚合酶扩增所得PCR产物3端带A,可直接进行T-A克隆。

 

  • 使用范围:

一般用于5 kb以下的对保真度要求不高的DNA产物的扩增、引物的延伸、序列的测定、DNA平末端加A等。

 

  • 质量控制:

经检测无外源核酸酶活性;SDS-PAGE检测纯度高于95%PCR检测无外源DNA残留。经实验证实,本公司Taq   DNA Polymerase能良好地扩增2.2 kb人基因组DNA片段和5 kb以下λDNA基因组片段,超过此扩增长度不能保证。

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质量控制

核酸外切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和1 μg λDNA -HindIII37℃下孵育4 hDNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和1 μg λDNA37℃温育4 hDNA的电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入2 U本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。

运输与保存方法

冰袋运输。-20 ºC保存,有效期1年。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 


PCR反应体系(推荐冰上配制)

组分

体积

终浓度

ddH2O

to 50 μL

-

HieffTM Taq Plus Buffer (Mg2+,dNTPs)

25 μL

DNA模板 

适量

 

Primer正向 (10 μM)

2.5 μL

0.5 μM

Primer反向 (10 μM)

2.5 μL

0.5 μM

HieffTM Taq DNA Polymerase(5 U/μL)

0.2 μL

1 U/50 μL

【注】: 1) 试剂使用:使用前要充分融化混匀。

2) 聚合酶浓度:推荐使用1 U/50 μL。可以在0.5-2 U/50 μL之间进行优化,请勿超过2 U/50 μL

3Mg2+终浓度体系终浓度为1.5 mM。如有特殊需要,可用50 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索。

4) 不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系)

模板种类

用量

人基因组DNA

0.1-1 μg

大肠杆菌基因组DNA

10-100 ng

λDNA

0.5-5 ng

质粒DNA

0.1-10 ng

PCR扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

95℃

5 min

1

变性

95℃

30 sec

30-35

退火

55℃

30 sec

延伸

72℃

30 sec/kb

终延伸

72℃

7 min

1

】:退火温度需要根据引物退火温度调整,一般设置成低于引物退火温度1-2℃即可。

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产品名称

产品货号

规格

价格()

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