产品介绍

    本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，粗提物通过独特的过滤柱选择性结合离心除去内毒素，然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。 

产品特点
    1. 不需要使用有毒的***酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速，方便，从100～200ml大肠杆菌LB(Luria-Bertani)培养液中，可快速提取
      0.2～0.4mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80～90﹪。
    2. 获得的质粒产量高，超螺旋比例高，纯度好，可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、转染等各种分子生物学实验。 

无内毒素高纯质粒大量提取试剂盒(离心柱型)产品储存
    本产品收到后按照说明书指示温度存放各成份，储存18个月不影响使用效果。 
 

无内毒素高纯质粒大量提取试剂盒(离心柱型)自备试剂

    无水乙醇

 

无内毒素高纯质粒大量提取试剂盒(离心柱型)注意事项

    1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比

       例增加P1、P2、P3的用量，洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间，以增加提取效率。

    2. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可

       能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。

       本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。

    3. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗

       脱，质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影

       响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。