介 绍 Introduction
在分子生物学实验中通常要使用有机***酚用于核酸的提取及纯化。但是工业生产的初级结晶***酚通常含有杂质及氧化产物,而这些东西是会严重影响核酸的质量的,因此***酚在使用前必须经过蒸馏以去除***酚中的杂质及氧化产物。但是由于***酚的沸点是 181.8 ℃左右,且又是一种强烈腐蚀性易挥发的化学试剂,所以在做***酚溶液的过程是一项耗时又危险的过程,且在做的过程中的预防措施比如戴防护眼镜、手套,通风柜等都是必须的。
特 点 Features
• 产品齐全。我们所提供的产品包含平衡酚、预混合酚、饱和酚等。
• 在 ISO9001 质量保障体系及严格的质量控制下生产。
• 可用于 RNA 、 DNA 的提取,无 RNase 、 DNase 酶污染
• 为客户避免了各种复杂、危险的处理问题,并提供了一个更加方便、安全和容易选择的酚溶液。
操作说明 Procedure
通常用一系列有特定 pH 的酚和酚氯仿试剂抽提细胞、组织、细菌、病毒、真菌、植物等中的核酸,***酚和氯仿都能使蛋白质变性,并使其溶于有机相或中间相内,而核酸只溶于水相,在离心之后溶于水相的核酸可再次用等体积的氯仿:异戊醇抽提( 1 , 2 , 3 )。
在 RNA 的提取中以上这些抽提步骤主要是考虑到减少 RNA 的损失,由于不溶性蛋白与 mRNA 的复合物主要存在于中间相内。氯仿能增加核酸的提取效率,主要是因为氯仿能减少 mRNA 在中间相的损失。氯仿的作用是能使不溶性蛋白变性并能帮助去除脂类,因而能促进核酸在水相内的分布,相分离也就能提高,使水相能尽量减少与有机相的交叉污染。
通常异戊醇也会被加入到酚:氯仿中以减少乳化现象。
应 用 Applications
在不同的酚 pH 下,DNA 即会被分配到有机相也会被分配到水相(5 ,6),为了选择最适合你应用的酚溶液,就必须理解在核酸提取中 pH 对酚功能的影响,DNA 是依靠pH来分配的,在pH7.0或者更高时DNA和RNA都被分配到水相中,在酸性pH低于 7.0 时,DNA 会被变性并被分配到有机相和中间相,只剩 RNA 存在于水相。在很多 DNA 提取过程中使用 pH8.0 的酚:氯仿:异戊醇。在需要去除大部分的 DNA 以提取纯的总 RNA 时,可以使用酸性酚或酸性酚:氯仿溶液。氯仿能帮助减少 mRNA 的损失,由于mRNA 与不溶蛋白的复合物会被分配到中间相内。(当提取的总RNA中有少量基因组DNA的污染时对Northern blotting 、nuclease protection assays 的结果是不会有影响)。


名称 | 应用 | 备注 |
平衡酚 Equilibrated with Tris-HCl,pH8.0, 1.0mM EDTA , Phenol phase pH7.8 ± 0.2 | 核酸提取( DNA/RNA) | |
饱和酚 Saturated with citrate buffer pH 4.3 ± 0.2 | RNA 提取 从 RNA 溶液内去除 DNA | 在酸性条件下 DNA 被分配到有机相 需要用到氯仿和异戊醇 氯仿和异戊醇能增加界面的稳定性,并能防止在混合时的起泡 |
酚 : 氯仿 : 异戊醇 (25:24:1) Equilibrated with Tris-HCl,pH8.0, 1.0mM EDTA , Phenol phase pH7.8 ± 0.2 | 核酸提取( DNA/RNA) | 氯仿和异戊醇能增加界面的稳定性,并能防止在混合时的起泡 |
订购信息 Order information (包括保存条件)
Cat# | 产品名称 | 规格 | 价格 | 备注 |
BSA02M1 | Tris 平衡酚,pH8.0 | 100ml | ¥100.00 | |
BSA03M1 | 酚:氯仿:异戊醇 (25 : 24 : 1) | 100ml | ¥100.00 | |
BSA04M1 | 柠檬酸盐饱和酚, pH4.3 ± 0.2 | 100ml | ¥100.00 | |
BSA05M1 | 水平衡酚 | 100ml | ¥100.00 | |
以上产品在未开盖 4℃ 下能稳定保存> 6 个月。
参考文献 References
• Ausubel, F.A., Brent,R., Kingston, R.E., Moore, D.D., Seidman, J.G., Smith, J.A., Struhl, K., (1987) Current Protocols in Molecular Biology.
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• Sambrook, J., Fritsch, E. F., Maniatis, T., (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual 3nd Edition.
• Perry, R. P., Torre, J. La, Kelly, D. E., and Greenberg, J. R. (1972) Biochem. Biophys. Acta 262, 220.
• Brawerman, G., Mendecki, J., and Lee, S. Y. (1972) Biochemistry 11, 637.