BCA 蛋白定量试剂盒 英文名称: BCA |
型号:null 产品货号: xy101-01 |
价格:请致电:010-57128832,18610462672 |
品牌: 中国/美国 试剂级别: 分子生物学级 |
BCA 蛋白定量试剂盒 产品介绍 BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。 BCA 蛋白定量试剂盒注意事项 1. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准 曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用精确度高的加样枪。 2. Solution A和Solution B混合成工作液时可能会有浑浊,但充分振荡混匀后就会消失,成为淡绿色的透明溶液。 3. 需酶标仪一台,测定波长为540-590nm之间,562nm最佳;需96孔板。如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但是测定蛋白浓 度时,需根据测定吸光度的杯子的体积,按比例调整A液,B液和样品的体积。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品 数量可能会显著减少。 4. BCA蛋白定量试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保无EGTA,EDTA低于10mM,二硫苏糖醇低于1mM,β-***低于1mM。不适 用BCA法时建议使用Bradford法蛋白定量试剂盒。还可以考虑用超纯水稀释,透析/除盐,ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消 除干扰物质的影响。 5. 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热,但是切勿过热。 6. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,请试用Bradford法蛋白定量试剂盒。 |