| 蛋白G纯化预装柱，1ML 英文名称： Protein G 4FF Chromatography Column, 1ML | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 型号:： 36413ES03 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 价格:请致电：010-57128832,18610462672 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 品牌: yeasen 产品商标: yeasen | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Protein G 4FF Chromatography Column, 1ML 蛋白G纯化预装柱，1ML 产品信息
产品描述 天然蛋白G（Protein G）是一种分离自G型或C型链球菌属的细胞表面蛋白，与发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面的蛋白A类似，主要通过与免疫球蛋白（Ig）的Fc区相互作用，结合大多数哺乳动物的IgG，可用于多种抗体（单抗和多抗）的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上，ProteinA 和Protein G结合性能不太一样，相比ProteinA， ProteinG 对牛、羊、马等多克隆抗体有更强的结合力，它还可以结合不能与ProteinA很好结合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1（详见附录1）。 本品使用的是基因改造后的蛋白G，不仅维持其本身的Ig亲和特性，同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合，Protein G Agarose Resin 4FF以高度交联的琼脂糖凝胶为基质，重组Protein G为配基，具有很高的物理化学稳定性，可以在相对较高的流速下进行抗体的纯化，适用于工业客户。利用本品经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体，使用方便，应用广泛。 本品Protein G 4FF Chromatography Column，1ml是一种装填了Protein G Agarose Resin 4FF的中压预装柱，规格1ml，预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA 等，方便客户操作。 产品性质
运输与保存方法 冰袋运输。4℃保存，2年有效。 需准备试剂 【注】：建议以下缓冲液在使用前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。 结合/洗杂缓冲液：0.15M NaCl, 20mM Na2HPO4, pH7.0 洗脱缓冲液：0.1M甘氨酸，pH 3.0 中和液：1M Tris-HCl，pH 8.5 使用方法 【注】：上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值，可以用结合/洗涤缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释，或者样品用结合/洗涤缓冲液透析。 1样品纯化（以Akta系统为例） 1）准备：将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。 2）清洗：3-5倍柱体积去离子水冲洗层析柱中储存液。 3）平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。 4）上样：将样品加到平衡好的层析柱中，推荐流速1ml/min，保证目的蛋白与树脂充分接触，提高目的蛋白的回收率，收集流出液，待检测。 【注】：样品的粘度增加使得即使上样体积很少，也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压，使得进样器更难使用。 5）洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，直到紫外吸收达到一个稳定的基线，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。 6）洗脱：用洗脱Buffer 采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中，通常5倍柱体积洗脱液足够将目的蛋白洗脱下来。也可以用一个小的梯度，例如20倍柱体积或更多，来分离不同结合强度的蛋白质。 7）清洗及保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被细菌污染。 2 SDS-PAGE检测 将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。 3 树脂清洗 随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量下降，影响柱子的性能，这时需对柱子进行清洗： 1）去除沉淀或变性物质 ② 用5倍柱体积的PBS，pH 7.4 清洗。 2）去除由于疏水性吸附造成的非特异吸附物质 ① 用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗； ② 用5倍柱体积的PBS, pH 7.4 清洗。 注意事项 1）请勿冷冻保存本产品。 2）所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。 3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 附录1. 蛋白A，G对不同物种Ig的结合能力总表
附录2 常见问题与解答
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