北京/中国Brand,null 产品货号： RP1100Item#, 通用RT-PCR试剂盒(M-MLV)

通用RT-PCR试剂盒(M-MLV)

货号：RP1100

规格：25T/50T/100T

保存：-20℃保存，避免反复冻融，复检期为 1年。

产品内容：

试剂盒组成 25 次 50 次 100 次

M-MLV(200U/ul) 25ul 50ul 50ul×2

5×M-MLV Buffer 100ul 200ul 400ul

Oligo(dT)16(10uM) 50ul 100ul 200ul

RNasin(40U/ul) 12.5ul 25ul 50ul

dNTPs(10mM) 50ul 100ul 200ul

Taq Polymerase(5U/ul) 12.5ul 25ul 50ul

10×PCR Buffer 125ul 250ul 500ul

RNase-free ddH2O 500ul 1ml 1ml×2

说明书 1 份 1 份 1 份

产品简介：

本试剂盒适用于各种 RNA 制品的反转录反应以及随后的PCR 扩增。它采用M-MLV 进行反转录反应，

能够获得较长的反转录产物。同时，在20ul 反转录体系和50ul PCR 反应体系中，还可以一次性得到足够

量的PCR 产物用于后续的克隆实验。

本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT 酶采用进口的M-MLV，所以cDNA 更长，基因的信息保留得

更完整！反转录过程中特异的RNase 抑制剂可有效降低由于外源RNase 污染而导致实验失败的风险。本试

剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA 克隆及目的基因检测等分子生物学实验。

操作步骤：

一、反转录反应

1、在冰浴的无RNase 的离心管中加入如下反应成分：

1-5ug 总RNA 或50-500ng mRNA

2ul Oligo(dT)16 或2 pmole 基因特异性引物

补RNase-free ddH2O 至14.5ul

2、70℃保温5min 后迅速在冰上冷却2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：

4ul 5×M-MLV Buffer

1ul dNTPs

0.5ul RNasin

1ul M-MLV

3、42℃温浴60min，如果是用随机引物，请先将离心管置25℃温浴10min，再42℃温浴60min。

Solarbio

Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd

Tel: 010-56371207

Fax: 010-56371281/82

Http://www.solarbio.cn

5、用RNase-free ddH2O 将反应体系稀释到50ul，取2-5ul 进行PCR 反应。

二、PCR反应

1、按以下各组分配制50ul PCR 反应体系：

10×PCR Buffer 5ul

dNTPs 1ul

上游引物（用户自备10um） 1ul

下游引物（用户自备10um） 1ul

RT 反应产物 2ul

Taq Polymerase 0.5ul

ddH2O x ul

Total Volume 50ul

2、混匀后短暂离心，PCR 仪扩增，琼脂糖凝胶电泳观察结果。

注意事项：

1、用于cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC 进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不

能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。

2、试剂盒的各组分应在-20℃保存，避免反复冻融，有效期12 个月。

3、 RNA 样品要避免反复多次冻融，应使RNA 在冰浴中处于融化状态。