英文名称： ClonExpress II One Step Cloning Kit
高效无缝克隆，一步轻松搞定！
ClonExpress® II One Step Cloning Kit
● 简单、快速、高效，适用于任何载体
● 不依赖于连接酶，无载体自连现象，阳性率可达95%以上
● 可高效克隆50 bp-10 kbp DN**段
● 线性化克隆载体和PCR产物可不进行纯化直接克隆
● 无需考虑插入片段自身携带的酶切位点
克隆效率极高
图1. 重组产物转化后平板上一般可形成数千个单克隆，而无插入片段的阴性对照反应转化后只有数个单克隆形成。因此ClonExpress系统的自连背景会大大降低连接酶依赖的克隆方式。
克隆阳性率95%以上
图2. 鉴定酶切结果表明，克隆阳性率可达95%以上。
ClonExpress® II是新一代的重组克隆试剂盒，包含增强的重组酶Exnase® II，可以显著提高重组克隆效率。首先将载体进行线性化，并在插入片段PCR引物5-端引入线性化载体的末端序列，使得PCR产物5和3最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列（15bp～20bp）。这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化载体按一定比例混合后，在Exnase® II的催化下，反应30 min即可进行转化，完成定向克隆，阳性率可达95%以上。
引物设计原理
图3. 插入片段扩增引物设计方式示意
ClonExpress 系统的引物设计方式可概括为15bp载体序列+完整的酶切位点+基因特异序列。