操作说明

细胞冻存：
1. 配制冻存液：90%PSCeasy完全培养基，10%DMSO；置于冰上备用。
2. 吸走干细胞培养基，并且用1mL PBS溶液洗一次。
3. 加入1mL 0.5 mM EDTA的PBS溶液，
4. 室温孵育5-8分钟或37℃孵育3-5分钟，显微镜下观察到细胞变圆，肉眼观察到细胞集落变得不透明且发白，表明细胞消化时间理想。
5. 吸去EDTA溶液，加入冰冷的冻存液。
6. 小心吹打，使干细胞集落脱落并打散。
7. 1-5x106/mL, 1mL每管冻存。
8. 以1℃每分钟的速率降至-80℃过夜（一般常见商品化冻存盒均可提供此条件）
9. -80℃过夜后，将冻存细胞转移至液氮。

细胞复苏：
1. 将PSCeasy解冻培养基（Thawing medium）和包被过的培养板取出置并平衡至室温。
2. 37℃解冻细胞，小心摇晃使细胞融化至仅剩一小块冰晶，迅速取出并用70%酒精消毒冻存管外表面。
3. 将细胞悬液移植一个新的15mL离心管。
4. 逐滴加入室温PSCeasy解冻培养基至5mL，滴加过程中不断轻摇混匀。
5. 200g离心5分钟。
6. 弃上清，PSCeasy hES/iPS thawing medium 重悬并接种到培养板37℃孵育48小时，无需换液。
7.换掉PSCeasy解冻培养基，加入PSCeasy完全培养基继续培养。