英文名称： MycAwayTM-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit
| V1.1 |
MycAwayTM-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit
一步法快速支原体检测试剂盒
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
| MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原体检测试剂盒 | 40611ES25 | 25T | -20℃ | 467 |
| 40611ES60 | 100T | -20℃ | 1537 |
产品描述
MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit是利用Yeasen独特的等温扩增技术，专门针对细胞培养液中支原体污染的快速检测产品。较以往支原体检测产品，本试剂盒使用更为简便，只需吸取1μl疑似支原体污染的细胞培养上清加入反应体系中，61°C孵育45分钟即可，其主要原理是若细胞培养物被支原体污染，支原体DNA的保守序列会被大量、快速地扩增，使反应液由蓝紫色变成天蓝色，结果肉眼可辨，无需电泳。
翊圣MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit可以检测多种支原体，包括细胞培养过程中常见的8种支原体。传统巢式PCR支原体法检测法易受细胞培养上清中抑制物的影响，产生假阴性结果；反应后需开盖电泳检测，增加污染导致的假阳性风险。一步法支原体检测试剂盒完全没有上述缺点，且其检测灵敏度、准确性远远高于PCR法。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
| 40611ES25/25T | 40611ES60/100T | ||
| 40611-A | MycAwayTM-Color A | 600 μl | 600 μl×4 |
| 40611-B | MycAwayTM-Color B | 25 μl | 25 μl×4 |
| 40611-C | Positive Control | 10 μl | 10 μl×4 |
| 40611-D | 矿物油 | 500 μl | 500 μl×4 |
运输与保存方法
冰袋运输。
-20℃避光保存，保质期18个月。若较长时间不用，请注意避光保存。
1）使用本试剂前请仔细阅读说明书。
2）整个实验，应规范操作，包括反应体系的配制、样本处理及加样。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 支原体待检样本准备
贴壁细胞：直接吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上，且汇合度达到90%左右时取样，此时上清中支原体含量较高，便于检出。
悬浮细胞：500 g离心5min后，吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上时取样，此时支原体含量较高，便于检出。
2. 反应体系
将MycAwayTM-Color从-20 °C取出，溶解后颠倒混匀，瞬时离心确保所有液体落到管底。根据待检测样品量，在200μl配制如下体系（通常一次实验设置一个阴性对照、一个阳性对照）：
| | 单次反应体积 (μl) | | 总体积 (μl) |
| MycAwayTM -Color A | 24 | ×样品数 × 1.1* | _____ |
| MycAwayTM-Color B | 1 | _____ |
【*】：移液器存在误差，配制时请多出10%为保证分装后每管的量。
3. 加样
阴性对照：第一支反应管中不加入任何样品，作为阴性对照；
待测样品：向其余反应管中加入1μl待测培养上清；
阳性对照：向最后一个反应管中加入1μl Positive Control，作为阳性对照。如果反应是在水浴锅中进行，则每管加入20μl矿物油，以防止液体蒸发导致结果的误差。如果反应是在PCR仪中进行，不需要加矿物油。
【注】：实验室中支原体污染十分常见，鉴于本试剂盒反应灵敏，建议用户在超净台中配制反应组分，以免出现假阳性结果。
4. 反应条件
将水浴锅或PCR仪设置为61°C，放入反应管，恒温孵育45 min。
【注】：本试剂盒所用酶对温度非常敏感，强烈建议使用PCR仪操作；如用水浴锅，应先加热使其达到规定温度后再反应。温差超过2°C，将导致扩增效率降低，使阳性反应无法在说明书规定的时间内达到典型的天蓝色。
5. 结果判断
61°C反应45min后，立刻取出反应管，放于室温。于光线良好的环境中观察反应结果（建议以白纸为背景）。如果反应液仍为蓝紫色，则判定为阴性；若反应液为天蓝色，则判定为阳性。颜色如下图所示，也可以阴性反应管与阳性反应管作对照。
【注】：当支原体污染较少时，45min后反应管的颜色可能介于阴性与阳性之间，此时反应时间可延长15min，但总时间不建议超过60min，否则可能产生假阳性。反应管不可开盖，因为产生的气溶胶可能会产生交叉污染。
阴性阳性
更多支原体检测、去除、预防产品详见：http://yeasen013.bjsx32.host.35.com/Productfeature/1660.htm
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