Thermo Scientific SDSPAGE样品制备试剂盒可以去除蛋白样品中可能影响SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）的高盐、变性剂、去污剂及其它缓冲液成分。使用该方法还可以将蛋白样品浓缩六倍，使每个样品孔中可以上样更多的蛋白。对2D凝胶电泳分析样品进行适当的处理是蛋白质组研究中经常遇到的问题，也是非常重要的步骤。对样品的处理会对得到的数据的质量产生巨大的影响。我们已经研发出一系列用于突破这个瓶颈的试剂盒。Thermo Scientific 2D样品制备试剂盒适用于包括细胞膜、细胞核、来自于组织或培养的细胞的全总蛋白和胞质蛋白在内的多种样品。Thermo Scientific2D样品制备试剂盒利用Thermo Scientific PAGEprep树脂和/或脱盐-缓冲液交换方法来快速地浓缩样品并去除盐、缓冲液及其它小的离子污染物。
SDS-PAGE样品制备试剂盒使用修饰过的硅藻土的独特树脂来结合DMSO中的蛋白。仅需要将2-350微升样品和20微升Thermo Scientific PAGEprep树脂及DMSO混合即可，样品中最高的蛋白浓度为70微克。在蛋白结合到树脂上之后，洗涤掉未结合的污染物。最后使用50微升洗脱缓冲液洗脱样品即可。回收的蛋白样品可以与试剂盒中提供的5X 上样缓冲液混合以便进行电泳。而且洗脱缓冲液与Thermo ScientifiBCA蛋白定量分析试剂盒兼容，在上样前确定最终的蛋白浓度。
很多种物质都会与常规上样缓冲液中的成分产生反应，从而对聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）产生干扰。例如将含有6M 盐酸胍的蛋白样品与Laemmli缓冲液混合会产生沉淀并导致样品在凝胶中的电泳效果不理想。幸运的是，使用SDS-PAGE样品制备试剂盒可以净化样品中含有的诸如促溶剂、去污剂、脂质、盐甚至是极端的pH等有影响的因素。
产品特点:
- 减少由于不兼容污染物造成的电泳假象，提供重复性好的SDS-PAGE结果。
- 快速且容易使用的离心管形式（微量离心）。
- 在20分钟以内将稀释的蛋白溶液富集成六倍浓缩液。
- 无需透析即可去除染料、还原剂、去污剂、糖、甘油、胍、尿素及硫酸铵。
- 对于大多数蛋白可以得到75-85%的蛋白回收率。
- 洗脱缓冲液与BCA蛋白定量分析试剂盒兼容，因此可以对处理过的样品进行定量。
- 最少可以处理2微升样品。
通过Thermo Scientific SDS-PAGE样品制备试剂盒可以高效地去除干扰性的物质。
对照（水） | 6M尿素 |
1M氯化钠 | 10%CHAPS |
2 M硫酸铵 | 25%甘油 |
20%SDS | 10%OTG |
10% Triton*去污剂 | 2 M盐酸胍 |
6 M尿素：DMSO（比例为1：3） | 40%蔗糖 |
降低由于去污剂造成的条带扭曲。使用Thermo Scientific Mem-PER试剂盒（产品货号89826）抽提细胞得到含有去污剂的膜蛋白组分（m）及可溶蛋白组分（s），然后利用SDS-PAGE分析分别用或没用SDS-PAGE样品制备试剂盒处理后的两个组分。图片是利用化学发光法蛋白质免疫印迹分析细胞色素氧化酶亚基4（COX 4）。试剂盒处理过的样品去除了干扰电泳的去污剂，而保持原始样品中相关蛋白的水平。
使用Thermo Scientific SDS-PAGE样品制备试剂盒可以得到稳定的蛋白回收率。利用试剂盒处理分子量分别为30K、44K、80K、86K、12K的纯蛋白（60微克）及细菌裂解物。利用BCA蛋白定量分析试剂盒测定蛋白浓度并计算蛋白回收率百分数。
高效回收并浓缩蛋白样品。对浓度为0.1毫克/毫升的纯化的牛血清白蛋白（BSA）样品进行电泳，并利用考马斯染料（产品货号24590）进行染色。泳道1： 分子量标准（产品货号26691）。泳道2：10微升（1微克）的BSA样品。泳道3：利用SDS-PAGE样品制备试剂盒处理后的10微升BSA样品。泳道4：利用SDS-PAGE样品制备试剂盒处理200微升BSA样品，然后用20微升上样缓冲液进行回收。将泳道3与泳道2进行比较可知蛋白回收率很高。将泳道4与泳道2进行比较可知对原样品进行了10倍的浓缩。
订购信息：
产品货号 | 描述 | 包装 | 价格 |
89888 | SDS-PAGE样品制备试剂盒 可处理50个样品。 包括： PAGEprep树脂（浆状物，溶剂为DMSO） PAGEprep洗脱缓冲液 DMSO 离心收集管 - **纤维素薄膜滤器 收集管 泳道指示剂，非还原性上样缓冲液（5X） | 试剂盒 1ml 5ml 27ml 50个 72个 5ml | ￥1,940 |
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产品货号 | 描述 | 价格 |
23225 | BCA蛋白定量分析试剂盒 | ￥2,033 |