DL 15000 DNA Ladder说明书货号：M1700规格：50T（250μl）/100T（500μl）保存：4℃有效期6个月，-20℃有效期1年。产品简介：本产品是由7条带状双链DNA条带组成，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。 本产品为即用型产品，已含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。本产品7条带分为250，1000，2500，5000，7500, 10000, 15000bp，其中2500bp的条带浓度大约为100ng/5μl，其他条带大约50ng/5μl。储存液成份： 10mM Tris-HCl（pH8.4） 10mM EDTA 0.02％溴酚蓝 5％甘油使用方法： 1.取5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中（每1mm加样孔宽度约加1μl，如果加样孔较宽，可适当增加上样量）进行电泳。 2.建议凝胶浓度为1％琼脂糖凝胶，电泳电压不宜过高，尽量控制在5v/cm左右，电泳时间30-40分钟。 3.通过EB染色，在紫外灯下观察电泳条带。5μl上样，1.0%琼脂糖凝胶电泳示意图注意事项：及时更换电泳缓冲液并使用新鲜配制的琼脂糖凝胶，以免影响电泳结果。相关产品：A8201 琼脂糖D1020 10×DNA上样缓冲液E1020 EB溶液(10mg/ml)G8142 GoldView ‖型核酸染色剂(5000×)T1060 50×TAE 缓冲液T1050 5×TBE 缓冲液M1200 100bp DNA LadderM1600 MarkerⅢ DNA Ladder

GelRed 核酸染料（500μL in water, 10,000 X）使用方法： 

1．胶染法（用法同EB） （1）制胶时加入GelRed核酸染料（例如：每50mL琼脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×储液，以此比例类推）。 （2）按照常规方法进行电泳。 注意事项： 此方法染色染料用量相对较少，500 μL染料大约可以做100块50 mL的胶。 由于GelRed具有良好的热稳定性，可以在热的琼脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将GelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。GelRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。 含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备，并长期保存直到使用。 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。 

2．泡染法 （1）按照常规方法进行电泳。 （2）用H2O将GelRed 10,000×储液稀释约3,300倍到0.1 M NaCl中，制成3×染色液。（例如将15μL GelRed 10,000×储液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H2O中）。 （3）将凝胶小心地放入合适的容器中，如聚丙烯容器中，缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶，室温振荡染色30 min左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5～10％丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30 min到1 h，并随丙烯酰胺含量增加而延长。

GelRed 核酸染料（500μL in water, 10,000 X）注意事项： 

1）用泡染法染色时，染料用量较多，单次使用的染色液可重复使用3次左右。3×GelRed染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。 

2）如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。

3）如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度、延长凝胶时间以保证边缘清晰、改进上样技巧或选择泡染法染色。 

3．预染法（最省染料的染色方法，按25μL体积上样，500μL原液理论做20万个样品） 

1）该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳 

2）工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的GelRed原液稀释1000倍，即为10 X GelRed工作液。GelRed工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。

3）制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。 

4）样品染色：向分析样品中加入GelRed工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使GelRed与样品中DNA充分结合。GelRed工作液加入量为总上样量的1/10，使GelRed在上样时的终浓度为1X. 

5）DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和1μLGelRed工作液混匀，室温放置5分钟，使GelRed与DNA充分结合。 

6）上样、电泳：按常规操作。 注意事项： 根据染料分子量小，带电荷少的特性开发本染色方法，按照一块胶10个样品计算，500μL原液理论上可以完成2万块胶的染色。 

GelRed 核酸染料（500μL in water, 10,000 X）疑难解答： 

1. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中，GelRed 可以全部从双链核酸上去掉。

2. 如果想对用 GelRed 染过的胶进行 Southern blots，建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。

3. 在紫外照射***下，与双链 DNA 接合的 GelRed 呈现红色荧光。

4. GelRed对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

5. GelRed原液在室温保存，如放置冰箱保存会产生部分沉淀，使用前适当加热并摇匀即可正常使用。