| u 两步法。使用AMV，在15分钟内对（polyA）+RNA进行高效逆转录。系统提供Oligo（dT）和随机引物。可以用随机引物和Oligo（dT）扩增出所有mRNA。 u 详细说明：Avian Myeloblastosis Virus Reverse Transcriptase （AMV RT，AMV 逆转录酶）催化以DNA、RNA或RNA:DNA杂交体为模板的DNA聚合反应（1）。它需要引物（DNA引物比RNA引物效率更高）以及Mg2+或Mn2+。该酶具有内在的RNase H活性，非离子表面活性剂和氢硫
根化合物可在体外增加该酶的活性。 u 特点
• 高浓度产品：Cat.# M9004含有浓度为20-25u/ml的AMV RT 600 单位。
• 提供5×反应缓冲液：250mM Tris-HCl （pH 8.3,25℃），250mM KCl，50mM MgCl2, 2.5mM 精胺, 50mM DTT。
• 温度稳定性：由于AMV RT在较高反应温度下较稳定（37-58℃），特别适用于具有复杂二级结构的模板的逆转录。 u 用途
• cDNA第一及第二链的合成。
• 引物延伸及RNA测序（2）。
• RT-PCR。可以将10ml含有AMV RT及反应缓冲液的产物直接加入含Taq DNA聚合酶的50ml PCR反应体系中。如果使用GoTaq® DNA Polymerase 或 PCR Master Mix，可以在每50ml PCR反应体系中加入多至25ml RT反应产物。 |