| 小牛肠碱性磷酸酶 英文名称： Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 型号:null 产品货号： 20427ES80 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 价格:请致电：010-57128832,18610462672 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 品牌: yeasen | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP) 小牛肠碱性***酸酶 产品信息
产品描述 Alkaline Phosphatase，中文名碱性***酸酶，可将DNA、RNA的5’端***酸基团去除，常用于阻止载体的自连作用：在分子克隆实验中，DNA连接酶催化DNA连接时需要有***酸基团的存在，载体在经酶切后会在切点端保留一个***酸基团。而载体经碱性***酸酶去***酸化后因5’端无***酸基团，因而不可以和自身3’端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止，提高了目的片段插入率。另外，碱性***酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板，以及用于该酶蛋白的脱***酸作用等。 本品为小牛肠来源的碱性***酸酶，可以降解几乎所有***酸单酯，但是该酶不能水解***酸二酯或***酸三酯。 产品组分
产品性质
运输和保存方法 干冰运输。-20℃保存，本酶在保存条件下及其稳定。 注意事项 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法 1 DNA去***酸化 ①在1.5ml离心管中加入下列试剂：
【*】：单链DNA或含5’端突出末端的DNA推荐低温下孵育，平末端DNA或含3’突出末端的DNA建议在较高温度下孵育。 ②混匀上述试剂，于37℃或50℃孵育30min。或者37℃孵育15min后，再于50℃孵育15min。 2 酚氯仿法抽提DNA ①***酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）抽提2次。 【注】：推荐在酚提取前将其在含5 mM EDTA, 0.5% SDS ,50 μg/ml Proteinase K的溶液中56℃孵育30min以彻底灭活碱性***酸酶。在酚提取前于75℃孵育10min，灭活效果更佳。 ②氯仿/异戊醇（24:1）抽提。 3 乙醇沉淀DNA ①加入2.5µl 3M NaCl(终浓度150mM). ②加入125µl（2.5倍体积）预冷乙醇，混匀后于-20℃放置30-60min，沉淀DNA。 4溶解DNA 离心，彻底去除乙醇后，将DNA溶于适量去离子水（＜20µl）。 相关产品
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