HieffTM Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 英文名称: HieffTM Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
型号:null 产品货号: 10101ES80 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
价格:请致电:010-57128832,18610462672 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
品牌: yeasen | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
HieffTM Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 产品信息
产品描述 HieffTM Taq DNA Polymeras是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶,分子量94 kD。具有5’ → 3’聚合酶活性和5’ → 3’外切酶活性,无3’ → 5’外切酶活性。扩增产物具有3′-dA,可轻松克隆用于T载体。 产品组分
产品应用 基因型鉴定、菌落PCR 活性定义 用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃,30min内,摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。 质量控制 核酸外切酶残留检测:20μL反应体系,10U本品和0.6μg λ-HindIII,74℃下孵育1h,DNA的电泳谱带无变化。 核酸内切酶残留检测:20μL反应体系,10U本品和0.6μg Supercoiled pBR322 DNA,74℃下孵育1h,DNA的电泳谱带无变化。 大肠杆菌残留DNA检测:50μL体系中,加入2U本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。 PCR反应体系(推荐冰上配制)
【注】: 1) 试剂使用:组分A和组分B使用前需充分融化混匀。 2) 聚合酶浓度:推荐使用0.025U/50μL。可以在0.025-0.04U/50μL之间进行优化。 3) 聚合酶添加:室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性,防止非特异性扩增,建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。 4) Mg2+ 终浓度:体系终浓度为1.5mM。如有特殊需要,可用25mM MgCl2,以0.2-0.5mM为间隔向上摸索。 5) 不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系):
PCR扩增程序
【注】: 1) 预变性温度和时间:推荐使用94℃。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30sec;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3min;高GC含量模板为5-10min。 2) 退火温度和时间:推荐使用60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为20sec,可以在10-30sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。 3) 延伸温度和时间:推荐使用72℃。 4) 扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。 注意事项 1. 推荐使用本公司PCR Enhancer (货号:10117),以扩增高GC含量的目的基因。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。 运输与保存方法 冰袋运输。-20℃保存。 相关产品
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