| 谷胱甘肽琼脂糖树脂（用于GST标签蛋白纯化） 英文名称： GSTSep Glutathione Agarose Resin | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 型号:null 产品货号： 20507ES10 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 价格:请致电：010-57128832,18610462672 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 品牌: yeasen | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
谷胱甘肽琼脂糖树脂（用于GST标签蛋白纯化） GSTSep Glutathione Agarose Resin 产品信息
产品描述 本品GSTSep Glutathione Agarose Resin是以4%琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高，使其每毫升基质可承载＞20mg GST融合蛋白。 此外，本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。 产品性质
运输和保存方法 冰袋运输。4℃保存，有效期2年。 注意事项 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用方法 1 缓冲液的准备 所用水和Buffer在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤除菌。 结合/洗杂缓冲液：PBS，pH7.4(140mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH7.4) 洗脱缓冲液：50mM Tris-HCl, 10mM 还原型谷胱甘肽，pH 8.0 【注】：结合/洗杂缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。 2 样品准备 样品在上样前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子。 3蛋白纯化 1）将GSTSep Glutathione Agarose Resin装入合适的层析柱，用5倍柱体积的结合Buffer平衡柱子，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。 2）Resin平衡后，加入蛋白样品，使其与Resin充分接触，提高目的蛋白回收率，收集流出液。 3）用10-15倍柱体积的洗杂缓冲液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。 4）使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即目的蛋白溶液。 5）依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。 4 SDS-PAGE检测 将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。 5 填料清洗 GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生，但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降，此时需对填料进行清洗。 1）去除一些沉淀或变形物质 用2倍柱体积的6M 盐酸胍溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。 2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质 用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。
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