在不限制性消化的情况下产生无缝质粒DNA或BAC克隆

Gibson组装过程从设计末端重叠20-40bp的dsDNA片段开始。对于Gibson组装超反应，采用了两步工艺。首先，DNA片段与2X Gibson Assembly®Ultra Master Mix a.结合，孵化产生重叠的自由端。酶失活后，反应缓慢冷却至退火重叠端。接下来，添加2X Gibson Assembly®Ultra Master Mix B，以便生成完全密封的结构。这种高效和稳健的克隆方法大约需要80分钟，并产生一个转染或转化准备，双链，完全连接的DNA结构。

GA超组装反应分两步进行，在两个连续步骤中添加两个主混合物。在第一步中，GA超级大师混合A（2X）通过咀嚼3'端的DNA，产生单链DNA 5'悬垂。该反应在允许互补重叠区退火的条件下冷却。下一步，添加GA Ultra Master Mix B（2X）。在这一步骤中，核苷酸被整合到构建物中，以填补退火DNA片段中的空白，而缺口被密封以创建一个相邻的DNA构建物。

Gibson组装方法允许在几乎任何载体中插入一个或多个线性双链DNA片段

在不限制性消化的情况下产生无缝质粒DNA或BAC克隆

Gibson组装过程从设计末端重叠20-40bp的dsDNA片段开始。对于Gibson组装超反应，采用了两步工艺。首先，DNA片段与2X Gibson Assembly®Ultra Master Mix a.结合，孵化产生重叠的自由端。酶失活后，反应缓慢冷却至退火重叠端。接下来，添加2X Gibson Assembly®Ultra Master Mix B，以便生成完全密封的结构。这种高效和稳健的克隆方法大约需要80分钟，并产生一个转染或转化准备，双链，完全连接的DNA结构。

GA超组装反应分两步进行，在两个连续步骤中添加两个主混合物。在第一步中，GA超级大师混合A（2X）通过咀嚼3'端的DNA，产生单链DNA 5'悬垂。该反应在允许互补重叠区退火的条件下冷却。下一步，添加GA Ultra Master Mix B（2X）。在这一步骤中，核苷酸被整合到构建物中，以填补退火DNA片段中的空白，而缺口被密封以创建一个相邻的DNA构建物。

Gibson组装方法允许在几乎任何载体中插入一个或多个线性双链DNA片段，而无需依赖兼容的限制性位点。Gibson组装法明显快于传统的基于限制性内切酶消化的克隆法，并被证明可以同时克隆小片段和大片段的双链DNA。使用Gibson Assembly®Ultra Master Mix，可以在一根试管中同时克隆一到十五个大小从100 bp到100 kb的插入物，采用高效的两步反应，克隆效率为95%。

订购信息：可提供支持10或50个反应的主混合物。Gibson UItra主混合液包括一瓶GA Ultra Master Mix A（2X）、一瓶GA Ultra Master Mix B（2X）和详细说明手册。请注意，本产品不包括Gibson Assembly®HiFi一步法套件中的GA阳性对照品。如果您是Gibson程序集的新手，或者需要验证的阳性控件进行实验，则可能需要考虑目录号GA1200-S、GA1200-10或GA1200-50。